產(chǎn)品分類(lèi)
Products新品上市:即用型高保真PCR試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng),咨詢(xún)南京信帆生物技術(shù)有限公司!
即用型高保真PCR試劑盒
1ml
3×1ml
試劑盒組成
Components
2×pfu Master mix
1mL
1ml×3
ddH2O
1mL
1ml×3
運(yùn)輸和保存溫度:
-20℃
制品說(shuō)明
本制品是將PCR反應(yīng)所需的pfu酶、dNTP混合物、MgCl2以及反應(yīng)緩沖液預(yù)先配置成2倍濃度的混合物。2X pfu Master Mix專(zhuān)為常規(guī)PCR擴(kuò)增反應(yīng)優(yōu)化,擴(kuò)增長(zhǎng)度可達(dá)4kb,能對(duì)4kb及其以下長(zhǎng)度的片段進(jìn)行地?cái)U(kuò)增。使用時(shí)只需再加入模板和引物并稀釋到1倍濃度即可進(jìn)行PCR反應(yīng),大大地簡(jiǎn)化了操作過(guò)程,減少了PCR操作過(guò)程中的污染。由于pfu酶具有3’-5’外切酶活性,因此使用本制品擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物3'端不含"A"堿基, 不能直接克隆于T-Vector中。2×pfu Master mix溶解后輕輕混勻分裝到PCR反應(yīng)管中-20℃保存,避免反復(fù)凍融,影響制品的性能。
特點(diǎn):
l :以λDNA為模板,擴(kuò)增長(zhǎng)度可達(dá)6kb,能擴(kuò)增≤4kb片段。
2 靈敏:可從0.5ng人基因組DNA模板中擴(kuò)增出特定基因片段。
3 穩(wěn)定:反復(fù)凍融十幾次,4℃放置30天,室溫放置一周后,擴(kuò)增性能不受影響。
4 快捷:PCR反應(yīng)所必需試劑全集于一管之中,數(shù)分鐘即可完成反應(yīng)體系配置。
5 便利:10μl, 25μl 或50μl體系全部適用。
產(chǎn)品用途:
1)常規(guī)PCR鑒定;
2)小片段目標(biāo)基因克??;
產(chǎn)品包裝:
Pfu DNA 聚合酶 100 units/ml
dNTPs 400μM;
MgCl2 4mM
活性定義:
在74℃條件下,30min內(nèi)催化10nmol dNTP的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量為一個(gè)單位。
常用反應(yīng)體系(50μl)
2X Pfu Master Mix*
25μl
上游引物
0.2-1.0uM(終濃度)
下游引物
0.2- 1.0uM(終濃度)
模板
1-50pg(質(zhì)粒);10ng-1μg(基因組)
ddH2O
至50μl
常用PCR循環(huán)
2
1)當(dāng)擴(kuò)增片段<3K:
94℃,3min
30次循環(huán):
94℃,30s
57℃,30s
72℃,
根據(jù)產(chǎn)物長(zhǎng)度調(diào)整, 120s/1kb
72℃ 5min
4℃ 保溫
2)當(dāng)擴(kuò)增片段≥3K(推薦引物長(zhǎng)度≥30bp):
94℃,3min
30次循環(huán): 94℃,20s
68℃,
根據(jù)產(chǎn)物長(zhǎng)度調(diào)整,120s/1kb
72℃ 5min
4℃ 保溫
Product Use Limitation:
This product is developed, designed and sold exclusively for research purpose and in vitro use only.
新品上市:即用型高保真PCR試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)